菌落計(jì)數(shù)器由計(jì)數(shù)器、探筆、計(jì)數(shù)池等部分組成,計(jì)數(shù)器采用CMOS集成電路精心設(shè)計(jì),LED數(shù)碼管顯示,字高13mm,清晰明亮,配合專(zhuān)用探筆,計(jì)數(shù)靈敏準(zhǔn)確,菌落對(duì)比清楚。便于觀察??蓮V泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。那么菌落計(jì)數(shù)器都是怎樣進(jìn)行計(jì)數(shù)的呢?小編來(lái)為您詳細(xì)講解菌落計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)方法。
1.計(jì)數(shù)器測(cè)定法:
即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。由于計(jì)數(shù)室的容積是一定的(O.1mm3),因而根據(jù)計(jì)數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù),可計(jì)算樣品中的含菌數(shù)。本法簡(jiǎn)便易行,可立即得出結(jié)果(本法不僅適于細(xì)菌計(jì)數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計(jì)數(shù))。
2.電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)法:
電子計(jì)數(shù)器的工作原理是測(cè)定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過(guò)一個(gè)細(xì)胞,當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過(guò)這個(gè)小孔時(shí),電阻明顯增加,形成一個(gè)脈沖,自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。
該法測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確,但它只識(shí)別顆粒大小,而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
3.活細(xì)胞計(jì)數(shù)法:
常用的有平板菌落計(jì)數(shù)法,是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長(zhǎng)出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋?zhuān)缓髮⒍康南♂屢哼M(jìn)行平板,根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù),可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高,是一種檢測(cè)污染活菌數(shù)的方法,也是目前國(guó)際上許多國(guó)家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意:①一般選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),過(guò)多或過(guò)少均不準(zhǔn)確;②為了防止菌落蔓延,影響計(jì)數(shù),可在培養(yǎng)基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
廣泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗(yàn),是z常用的活菌計(jì)數(shù)法。
4.比濁法:
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡(jiǎn)便快捷,但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液,得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目,對(duì)顏色太深的樣品,不能用此法測(cè)定。
5.測(cè)定細(xì)胞重量法:
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是測(cè)定絲狀真菌生長(zhǎng)量的一種常用方法。
6.測(cè)定細(xì)胞總氮量或總碳量:
氮、碳是細(xì)胞的主要成分,含量較穩(wěn)定,測(cè)定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量。此法適于細(xì)胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法(colour change unit,簡(jiǎn)稱CCU):
這種方法通常用于很小,用一般的比濁法無(wú)法計(jì)數(shù)的微生物,比如支原體等,因?yàn)橹гw的液體培養(yǎng)物是*透明的,呈現(xiàn)為清亮透明紅色,因此無(wú)法用比濁法來(lái)計(jì)數(shù),由于支原體固體培養(yǎng)很困難,用cfu法也不容易計(jì)數(shù),因此需要用特殊的計(jì)數(shù)方法,即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標(biāo),來(lái)計(jì)數(shù)微生物的相對(duì)含量的。